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ELISA 樣本處理的注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2015-04-17      瀏覽次數(shù):1371

每個(gè)標(biāo)本量收集體積= 50ul × 檢測(cè)種類,如要做復(fù)孔,標(biāo)本量收集體積= 50ul × 檢測(cè) 種類×2 

 對(duì)于作某一個(gè)具體指標(biāo)來說,先用一系列稀釋度作一批標(biāo)本測(cè)定,得出對(duì)實(shí)驗(yàn)有意義 的一個(gè)稀釋度(即測(cè)定劑量反應(yīng)曲線),然后用一個(gè)zui適稀釋度測(cè)定即可。

         收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在

4  備用,如有特原因要周期集標(biāo),標(biāo)時(shí)分裝放在 -20   -70  

件下保免反復(fù)。標(biāo)本 2 -8  可保存 48 時(shí), -20  可保存 1 個(gè)。 -70 

可保存 6 個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。

血清標(biāo)本采集時(shí),應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),  HRP 為標(biāo)記的 ELISA 測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。

      為了保證尿液檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,必須正確收集尿液標(biāo)本和保存。盛尿容器要清潔干燥。

使用一次性的容器(如塑料尿杯),避免因用藥并清洗不干凈而造成的污染,影響檢 測(cè)結(jié)果。尿液標(biāo)本必須新鮮,留取后,應(yīng)及時(shí)檢測(cè)或保存,以免細(xì)菌繁殖。因在室溫中久 置后(尤其是夏季)尿中磷酸鹽等可析出結(jié)晶而干擾檢測(cè)。

標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)如有細(xì)污染,菌體含有內(nèi)性HRP會(huì)產(chǎn)假陽性應(yīng)。 保存過久可發(fā)生聚合在 ELISA 中可使本底加深。

凍結(jié)標(biāo)本融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛 倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。

     混濁或有沉淀的標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測(cè)。

反復(fù)凍融會(huì)使蛋白效價(jià)降低,所以待測(cè)標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存。也可 加入適當(dāng)防腐劑

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